a mikrobiológiai diagnózis
Home | Rólunk | visszacsatolás
Diftéria bacillus - kórokozói a diftéria.
Diftéria - akut fertőző betegsége jellemzi toxikus elváltozás a kardiovaszkuláris rendszer és az idegrendszer, valamint a konkrét fibrines (diphtheritic), gyulladás helyén a bejárati kapu.
A kórokozót fedeztek fel 1883-ban, Klebs, 1884-ben F. Loeffler különválasztják neki tiszta tenyészetben. 1888-ban g. Roux és Yersin kaptak diftéria toxint, és a 1895-ben Behring és Py egymástól függetlenül kaptak diftéria szérum. 1923-ban Ramon kifejlesztett egy technológiát a termelés diftériatoxoid-, később megkapta a diftéria szérum. NG Gabrichevsky alkalmazott diftéria szérum terápiás célokra, és megszervezte a termelés Magyarországon.
View - C.diphtheriae
A Corynebacterium nemzetséghez tartozik mintegy 60 faj. A Nemzetközi Osztályozása Burgi nemzetség van osztva 3 részből áll:
1) patogén az emberre és az állatokra;
2) patogén növények;
Egyenes vagy enyhén ívelt rúd 0,3-0,6 x 4-8 mikron, és nem képez spórákat van mikrokapszula még.
Jellemzői diftéria bacillus jelenléte clavate megvastagításokat végein; pálca különböznek polimorfizmus; azzal jellemezve kölcsönös elrendezése baktériumok kenetek - a számok formájában V, X, L (nem a teljes variancia hasadási);
Ezek rendezve a "pin-beam" In vastag keneteket. Clavate megvastagodása végein társított jelenlétében szemcsék volutin (borjú Babes-Ernst) - származékai nukleinsavak, metahromatinovye granulátumok polimetafoszfát. Baktériumok képezhet szűrhető és L-formák.
Gram-pozitív mikroorganizmusok. Amikor festett módszerével Neisseria sejttest kék színű, valamint a gabona volutin - sárga. Leffler eljárás festi a citoplazmában egy kék színű, és a gabona volutin - sötétkék.
Diftéria - fakultatív anaerobok otimalnaya azok tenyésztés hőmérséklete 37 ° C, pH 7,3-8,0. Igényes a tápközeg a növekedéshez szükséges a jelenléte cisztin, hisztidin, fenil-alanin, metionin, stb A növekedési faktorok Ca 2+. Mg 2+. Fe2 +. Zn 2+. Mn 2+. Cu 2+. Termesztésre alkalmazott szérumot (Loeffler közepes) kiegészített tápközegre vér hinozalnuyu Buchina közegben. Differenciál-diagnosztikai média: telluritovaya közepes (Conradi, Troch, 1913.) Glitserinovokrovyanaya közegben tellurit (Clauberg szerda # 921; # 921;), tejsavó telluritovy agar és cisztin (Tyndall), tellúr-csokoládé agar McLeod.
Szerdán Leffler baktérium a formájában egy szürkés-krém típusú telepek „érdes”.
A környezetben telluritovyh gerjesztő formák szürkés fekete kolónia miatt tellurit redukció a fémes tellúr, amelynek egy fekete színű, és felhalmozódnak a baktériumok.
Diftéria bacillus inaktív, erjesztik savakat képezni glükóz, maltóz, galaktóz, dextrin, a szacharóz nem bomlik, a laktóz, a mannit, redukálja a nitrátokat nitritté. Karbamid nem hidrolizálódik (Zaks negatív minta) nem képeznek indol. Bomlik cisztein (Pisa pozitív minta).
Szerint a kultúra, biokémiai, patogenetikai és más tulajdonságait a diftéria bacilusok vannak osztva 3 biotípusú.
1) biovar Mitis, azzal jellemezve, hogy a következő tulajdonságokkal rendelkezik:
- fermentál glükóz, keményítő. maltóz nem fermentál szacharóz, glikogén, dextrin;
- tsistinaznoy aktivitással rendelkezik;
- visszaállítja nitrátok;
- ureáz minta negatív;
- A média tellurit formák finom sima, fényes fekete telepek sima éle;
- így egyenletes folyékony közegben zavarosság és porszerű csapadékot;
- Ez ad hemolízis vér média területén;
- alacsony toxicitást;
- kórokozó enyhe szórványos előfordulása.
2) biovar gravis, azzal jellemezve, hogy a következő tulajdonságokkal rendelkezik:
- fermentál glükóz, keményítő, dextrin, maltóz,
- tsistinaznoy aktivitással rendelkezik;
- visszaállítja nitrátok;
- ureáz minta negatív;
- a táptalajon tellurit formák nagy, száraz, unalmas, lapos, szürkés-fekete kolóniákat alkot, megemelkedett a központban, radiális barázdák és egyenetlen pereme (hasonló a százszorszép);
- folyékony közegben formázott fólia homályossága kroshkovidny vagy durva csapadékot;
- Ez ad hemolízis vér médiában;
· Egy markáns toxikus tulajdonságai;
· Különböztetni a betegeknél, akiknél súlyos diftéria okoz a flash-csoport.
3) biovar intermedius, azzal jellemezve, hogy a következő tulajdonságokkal rendelkezik:
· A média tellurit formák finom száraz matt szürke-fekete kolónia átlátszó kerülete és egyenetlen él;
· A folyékony közegben, majd a turbiditás ad bevont és generál finom csapadékot;
· A hemolízis vér média, hiányzik.
Diftéria bacillus amelynek két antigénkötő
1. - antigén (csoport), sejtfal poliszacharid, termikusan stabil, így kereszt-reakciók mikobaktériumok és nokardiyami;
2. - antigén (minta), kapszula, hő-labilis, immunogén, fajspecifikus.
A gyakorlatban, a szerotípus nem alkalmazható, azonban termelt szérum diagnosztikai RA, PHA.
Az azonosításhoz használ fágtipizálás (22 fág) és bakteriotsinotipirovanie (25 bakteriocinek).
Méreganyagok. Ragaszkodjon toxint - diftéria exotoxin. Az erő tart a harmadik helyet, miután a botulinum és a tetanusz. Hő-labilis, erősen mérgező, immunogén, védő, anaestheticus lépéseket. Gistotoksin van dermonekrotikus, hemolitikus tulajdonságait. Szintetizálódik, mint egy inaktív prekurzor - egyetlen polipeptid láncon, amelynek molekulatömege 61 kD. Aktivált az intézkedés alapján proteáz, amely levágja a polipeptid 2 összekapcsolt diszulfid kötések a peptid: A (21 kDa) és B (39 kDa). B peptid funkciója van akceptor - felismeri a receptor kötődik meg, alkotó intramembrán csatorna, amelyen keresztül belép a sejtbe peptid A. A peptiddel - egy olyan enzim, amely az átutalás az adenozin-difoszfát-ribóz NAD az egyik aminosav-maradék (hisztidin) a fehérje elongációs faktor EF 2. Ennek eredményeként a módosítása EF-2 jelenlétében elveszíti aktivitását, ami a fehérje szintézis gátlásának a riboszóma transzlokáció lépésben. A toxin szintetizálódik csak C. diphtheriae, lizogén mérsékelt a konvertáló a tox-profágot integrált helyspecifikus rekombináció. A operon a toxint kódoló szintézis promoter és Tox R3 szakaszok: Tox S, A Tox, tox B. Tox S - szolgáltatja a kimeneti toxin a membránon keresztül a periplazmatikus térbe a bakteriális sejt. Elvesztése sejt profág vagy mutációk Tox-operon teszi a sejtek kissé toxikusak.
Enzimekkel patogenitásnak. hialuronidáz, neuraminidáz, fibrinolizin, kataláz - invázió tényezők Leukocidin - szemben rezisztenciát biztosít fagocitózis;
Szerkezeti és kémiai komponensek a sejt - ivás (adhézió elősegítésére az érzékeny sejtek) mikrokapszula (rezisztenciát biztosít fagocitózis), zsinór-faktor (trehalóz difosfoefir-6-6, és korinemikolovaya korinemikolinovaya sav, amelynek ad foszforiláció mitokondriumokban) bakteriocineket (koritsiny) kódoló plazmidok, amelynek szintézisét továbbítani.
Amikor melegítjük 60 C. coli die 10 percen át 100 ° C-on jön azonnali halált. 5% karbolsavat megoldás biztosítja inaktiválása révén - 1 perc. Hatása alatt a közvetlen napfény bacillus túléli több órán keresztül, száraz film, és kelkáposzta - 3-4 hónap. A háztartási cikkek és ruházati tárolja legfeljebb 15 napig, plüssállatok - 3 hónap. A víz és a tej - legfeljebb 20 napig a porban - akár 5 hónapig. A diftéria bacillusok érzékeny penicillin, tetraciklin, eritromicin.
A fertőzés forrása - egy beteg személy, jármű vagy lábadozók.
átviteli mechanizmusok:
- aerogén (path - légi és szállópor);
- pin (path - közvetett érintés).
A beteg veszélyes (abban az értelemben, kihívás) az utolsó napon az inkubációs időszak.
Bejárati kapu - a nyálkahártya az orr, garat, gége, légcső, hörgők, kötőhártya, a külső nemi szervek; sérült felület, köldökzsinór seb.
A lappangási idő - 2-14-20 nap.
A kórokozók adszorbeáltunk az érzékeny sejtek megtelepedni a hám. Szekretálnak gistotoksin, hogy kezdeményezi a fejlesztését helyi fibrines gyulladás, nekrózis, epiteliális paretikus értágulatot károsodott permeabilitás, szöveti ödéma és kimeneti fibrinogént a vérerek. Fibrinogén befolyásolja szöveti tromboplasztin, nekrotikus szövet és koagulálódik légköri oxigén. Fibrines film képződik a felületen. A réteges laphám - vastag, hegesztett a szomszédos szövetek; egy egyrétegű - egy vékony, könnyen eltávolítható. A növekedés a film a légutak vezethet fulladás (igaz far). Folyamat kíséri a regionális nyirokcsomó. Szisztémás hatások a toxin vezet vérvesztéssel. Fejleszt toxikus myocarditis és korai bénulás a szív. Fennáll a veszélye a vese tubuláris rendszer, nekrózis a kortikális réteg. Az idegrendszer - citolízisének idegsejteket a fejlett bénulás a lágy szájpadlás, rekeszizom, szív, a vagus ideg. Halál is előfordulhat diftéria korai vagy késői bénulás szív és a rekeszizom, és ennek eredményeként a valódi darát (obstruktív légúti szakadás film).
A csecsemők nagyobb valószínűséggel alakul ki a torok diftéria (nasmokr, gyenge kifejezése a közös megnyilvánulásai). Meg kell vizsgálni a köldökzsinór seb elkerülése érdekében a helyi folyamatot.
Miután a betegség alakul ki, a toxicitás rezisztens törzsek, és kevés kifejezett antimikrobiális immunitást. Talán a fejlesztés a hordozó állapot (10%), és újra-fertőzés (6-8%). immunitás szintje beállítható a PHA. Diagnosztikai - hitelek - 1: 200 vagy ennél nagyobb. Az ugyanerre a célra a reakció Schick - intradermális microdoses diftéria toxin (1/40 DLM 0,2 ml) intradermálisan. 48 óra elteltével, van egy vörösödés és beszűrődés, ami arra utal, nem az antitoxikus antitestek; ha van ilyen reakció lép fel. Mivel a érzékenység veszélyét a szervezet, a minta végezzük ritkán.
Vizsgálati anyag - nyálkát a torok, orr és a mandulákat film, seb mentesítés, Blood
1. Módszer Bacterioscopic - kenet mikroszkópos vizsgálati anyag (Gram-festés, Neisseria, Leffler).
2. A bakteriológiai módszerrel - a választás a tiszta tenyészet a kórokozó és azonosítását is. Nem csak el kell különíteni a vizsgálati anyag diftéria bacillus, hanem hogy meghatározza annak toxicitást.
Meghatározása toxicitást S. dphtheriae:
a) a biológiai minta az állatokon - intradermális fertőzés tengerimalac tenyészet szűrletet diftéria baktérium - okozza nekrózis az injekció helyén. Minimális letális dózist (20-30 ng) megöli tengerimalac napon 4-5;
b) megfertőző csirke embrionális (megfigyelt haláleset hatására a toxin);
c) bevezetjük a sejttenyészet (detektálás CPE);
g) ELISA technika peroxidázzal jelzett antitest;
d) a használata egy DNS-próba kimutatására tox-operon a genomban;
e) Ilek és Ouchterlony teszt (1948) - alapján képes a toxin és antitoxin diffúz be az agar és a csapadékot képezni (bajusz, nyilak) során diffúziós - kettős kicsapásos módszerrel a gélben ideiglenes választ ki lehet adni elegyet 48 órán át 72 H - a következtetést a jelenléte toxigén Corynebacteria, 96 óra múlva - a végső választ.
3. szerodiagnosztizálására - TPHA, ELISA, RIA, CO-agglutinációs reakció, a reakció Schick.
4. Express - diagnosztika - IFA, ELISA, TPHA reakció agglutináció.
5. A biokémiai és molekuláris biológiai módszerrel - PCR (kimutatása tox-gén).