A reverz transzkriptáz (reverz transzkriptáz)

A reverz transzkriptáz - egy enzim, amely szintetizálja cDNS egy RNS templátról.

Néhány a virális genom nem DNS, mint a szokásos módon, és RNS-t. Ezek a vírusok nevezték retrovírusok (retro - hátra). 1970 g. D.Baltimor H.M.Temin nyitni, és információ átviteli mechanizmust a virális RNS-DNS, azaz ellentétben azzal, amit előfordul a magasabb rendű szervezetek sejtjeiben. Ezt a folyamatot nevezzük reverz transzkripció. és az enzimet, végez, volt az úgynevezett reverz transzkriptáz, vagy reverz transzkriptáz (revertase).

Reverz transzkriptáz, vagy reverz transzkriptáz (. Reverz transzkriptáz, [lat transcriptio - újraírás) - enzim RNS-függő DNS-polimeráz, amelyen keresztül a reverz transzkripciós - DNS-t szintetizálunk egy templát RNS; által kódolt genomját néhány RNS-vírusok és mobil genetikai elemek a genom magasabb rendű szervezetek, fontos „szerszám” a genenoy mérnöki. Reverz transzkriptáz legalább három enzimatikus aktivitása:

1) DNS-polimeráz, templátként mind RNS-t és DNS-t;

2) aktivitását RNáz-H hidrolizálja belüli RNS RNS-DNS hibrid, de nem egy-vagy kettős szálú RNS-t, és

3) egy DNS-endonukleáz aktivitást.

Nyisd függetlenül D. H. Temin és Baltimore 1970, az RNS onkogén vírusok (Nobel-díjat 1975-ben, együtt R. Dulbecco).

Ily módon reverz transzkriptáz képes elvégezni a DNS-szintézist a RNS-templát, polimerizáljuk a négy dezoxiribonukleozid trifoszfát jelenlétében. És ahogy a DNS-polimeráz, amelyeket csak a mag.

Reverz transzkriptáz szintézisében alkalmazott kettős szálú DNS komplementer RNS (különösen mRNS), az ezt követő klónozáshoz plazmid vektorok előállítására könyvtárak (klonotek) cDNS. A reverz transzkriptáz, DNS-polimerázokat, mint, lehet használni, hogy bemutassuk egy radioaktív vagy fluoreszcens jel DNS-be próbák tagjai megfelelően jelzett dezoxiribonukleozid-trifoszfát.

Az a képesség, hogy a DNS szintézisében egy RNS-templát, bizonyos feltételek mellett kimutatták a termostabil DNS polimeráz a Thermus thermophilus. Ez lehetővé teszi, hogy használja azt a közvetlen kimutatására specifikus RNS biológiai mintákban PCR-rel. Modern változatai ez a megközelítés lehetővé teszi egy egyetlen reakciókeverékben (és a csövet) szintetizálására reverz transzkripciós reakció, kis példányszám az amplifikált DNS-fragmenseket a templát-RNS, amely azonnal használható ugyanaz az enzim, mint a sablon egy hagyományos PCR (egy cső PCR).

Reverz transzkriptáz mieloblasztvírusból aktivitás mellett polimerizációs rendelkezik 5 „-> 3” és 3 „-> 5” tevékenységek ekzoribonukleaznymi és hasítja RNS RNS-DNS hibridek processzivitás mechanizmus.