Biokémiai tulajdonságai baktériumok

Másolásával, terjesztésével, kiadói a szöveget vagy annak egy részét a források, akkor fogadja el a felelősséget a hatályos törvények alapján.

Tenyésztésére szolgáló módszerek anaerob baktériumok

Tenyésztése anaerob spóraképző baktériumok, mint a (Clostridium). és asporogén (veylonelly, Bacteroides és mtsai.), hogy anaerob körülmények között.

Anaerob körülmények között hozható létre tenyésztjük anaerob. exszikkátorban (alján amely telepítve egy gyertyát, vagy lúgos oldatot öntöttünk piragalola elnyelő oxigén) és a biológiai módszer Fortner. Malkin és így tovább.

Amikor a vetés módszer Fortner Petri csészébe egy vastag réteg tápanyag agar felezik, a vágott szalag. Az egyik felét egy agar kultúra aerobok vet, a másik - anaerob. Egy csésze paraffinba ágyaztuk, és termosztátba helyezzük az első aerob baktériumok növekedés akkor következik be, amikor elfogy a csésze összes oxigén kezdődik anaerob növekedésre.

Amikor a vetés Malkina a módszer két cső egy levágott IPA. csatlakoztatott csőbe. Egy koca cső tenyészetét aerob másik -anaeroba Ha az oxigént kimerült növekedése során aerob baktériumok, anaerob növekedés kezdődik

Crops anaerobok termelnek egy közepes Kitty Tarotstsi álló BCH, 0,5% glükóz és a máj darab vagy darált hús. Az inokulálás előtt a tápközeget melegítjük vízfürdőn 10-15 percig a levegő eltávolítására, majd lehűtjük. Beoltás után a táptalajt öntünk réteg vazelint vagy paraffinolaj izolálására légköri levegővel

Izolálása tiszta tenyészeteket anaerob baktériumok

A gyakorlatban laboratóriumok általában izolálására tiszta tenyészeteinek anaerobok használt módszerek Tseysslera vagy Weinberg. A kiválasztási folyamata a tiszta tenyészet lehet osztani több szakaszban.

Az első szakasz. A vizsgálati anyag készített kenet, Gram-festéssel, vagy más módszerrel, és a mikroskopiruyut. Ha azt látja, gyanús az anaerob mikrobák vizsgálati anyagot beoltott szerdán Kitty Tarotstsi. Ha szükséges, a vizsgálati anyag előzőleg hígított steril 0,9% -os NaCl. A csöveket kiöntöttük réteg vazelint vagy paraffinolaj, jele, és tegye egy termosztáttal 37 ° C-on 18-24 órán át.

A második szakaszban. A következő napon, a növények böngészi és természetét írják le a növekedés. Készítsünk festett keneteken Gram mikroskopiruyut leírja morfológiai és színező tulajdonságai baktériumok. majd

termelnek reseeding Petri-csészében a vér agar cukrot, hogy izolált telepeket kapjunk. A lemezeket helyeztük anaerob és inkubáljuk 37 ° C-on 18-24 órán át.

A harmadik szakasz. A nézők növények, feltárása izolált telepeket, és leírják a természet a növekedés. A morfológiája a baktériumok által tesztelt előállítására kenetet a telepeket megfestjük Gram-festéssel. Továbbá, az elválasztás és a felhalmozási tiszta tenyészetben termelt reseeding gyanús telepeket egy csőbe a környezettel Kitty Tarotstsi. A csöveket inkubáltuk 18-24 órán át 37 ° C-on

A negyedik szakaszban. Ünnepeljük a vizuális jellegű növekedésének tiszta tenyészet az ellenőrzések elvégzésére kiemelte a kultúra tisztaságát, amelyre mikroskopiruyut (tiszta tenyészete morfológiailag és színező egységes).

Az első lépést hajtjuk végre azonos módon, mint a módszer Tseysslera. Ezután a vizsgálati anyagot, raisings Kitty Tarotstsi közegben, sorozatban hígítjuk kémcsövekbe a megolvasztott cukor és ostuzhennym IPA. Ami után átvittük egy Pasteur-pipettával 3-5 (Vigna cső). A beoltott kémcsöveket gyorsan lehűtjük hideg vízzel, és az agar megszilárdulásáig és rögzíti a szétkapcsolt helyzetben az egyes mikrobiális sejtek az oszlop mélysége az agar. A csöveket 37 ° C-on 18-24 órán át.

A második szakaszban. Miután nőtt fel szűk csövekben telepeket vizsgálták nagyítóval. A helyszínen a kiválasztott gyanús telepeket, hogy a vágás csöveket. Telepeket izolálunk, majd átoltjuk egy közepes Kitty Tarotstsi. A kémcsöveket egy inkubátorban 18-24 órán át 37 ° C-on

A harmadik szakasz. Egy nap múlva a kultúra dedikált check tisztaság.

Biokémiai tulajdonságai baktériumok

Baktériumok szintetizálni a különböző enzimek, tartozó hat osztály. Az enzim készítmény bármely olyan mikrobát határozza meg a genomban, és egy viszonylag stabil sajátosság. Ezért a meghatározást szacharolitikus, proteolitikus és más enzimek által alkotott bizonyos típusú kiviteli alakok, és még (biotípust) baktériumok fontos taxonómiai jelentősége, széles körben alkalmazó azok rendszertani és azonosító. Számos enzim (hialuronidáz, koaguláz et al.) Tulajdonságok hozzájárulnak a megnyilvánulása patogén ágensek, mert a fellépés szubsztrát olyan anyagok alkotják, hogy a sejtek és szövetek az emberi test.

Egyes enzimek lokalizáltak a citoplazmában, citoplazma membránon, és a periplazmatikus térben baktériumok - endofermenty, mások

- exoenzymes. a környezetbe engedni. Funkcionális exoenzymes társított értéket hasításával makromolekulák a környezetben, hogy egyszerűbb vegyületek.

Enzimek működhet egymástól függetlenül, vagy szorosan kapcsolódik egymáshoz, amely egy áramlási metabolikus reakciók sorrendben. Az utolsó nevezzük -multifermentnye komplexek (légzési lánc enzimek. Lokalizálódik a citoplazma membránon).

A baktériumok, három fő csoportra enzimek:

1. Konstitutív - folyamatosan szintetizált mikrobiális sejtekben.

2. Az indukálható - szintézisét által indukált megfelelő szubsztrát.

3. Repressibelnye - melyek szintézisét elnyomott eredményeként túlzott felhalmozódását reakciótermék által katalizált ezt az enzimet.

Az azonosításhoz a mikroorganizmusok - kórokozói a fertőző betegségek, amellett, hogy a morfológiai és tenyésztési tulajdonságokkal, szükséges, hogy tanulmányozza a biokémiai jellemzők, amelyek a következők: szacharolitikus. proteolitikus tulajdonságai baktériumok pigmento- és toxin képződését.

Baktériumok jellemzi egyenlőtlen képes használni a különböző szénhidrátok. A szénhidrát hasznosítási baktériumok képződését eredményezi a szerves savakkal vagy a savak és gázok.

Meghatározása szacharolitikus enzimek Hiss költ közegként 1% pepton víz. 0,5% bizonyos szénhidrát (glukóz, laktóz, mannit, stb) és a jelző Andred (savas fukszinnal 1N. NaOH-oldat). A úszó cső (üveg-cső, amelynek egyik vége le van zárva) lesüllyed közepes csapdázására halmazállapotú termékek. Frissen készített közeg szalmasárga színű. növények rögzített eredmények után 24-48 órával. A bomlás szénhidrátok bírálják el a színváltozás a médium (pirosra vált, ennek eredményeként a változó a pH a savas oldalig). Mintegy gázképződés jelzi gázfelhalmozódás az úszót.

Egyes baktériumok, és engedje a környezetbe, proteolitikus enzimek - proteáz katalizálja hasítása a fehérje.

Annak megállapításához, a proteolitikus enzimek - kollagenázok megszúrja beoltott tenyészetet vizsgált egy oszlopban hús-pepton-zselatin tápközegen (NRM). Időtartama a tenyésztést 7-10 napig tárolható szobahőmérsékleten. A pozitív eredmény, van cseppfolyósítása zselatin. Például: anthrax képez kráter-cseppfolyósító NRM.

A gyakorlatban, a proteolitikus aktivitása baktériumok leggyakrabban megítélni, hogy képes hasítani a fehérjét a mély bomlási termékek: indol

hidrogén-szulfid. Ebből a célból, a vizsgált tenyészetet oltunk a BCH közötti a dugó és a nyak a cső erősítő csíkok. At hidrogén-szulfid - a jelző impregnált papír ólom-acetát (a kiosztási H2S - ez blackens) és indol - vizsgálati impregnált papír egy oxálsav-oldattal (elosztása során indol - ez blush).

Jelenleg, hogy tanulmányozza a biokémiai tulajdonságait mutató baktériumok használt papír Rendszer (SIS), vagy multimikrotesty (MMT)

SIB - egy sor impregnáltunk különböző szubsztrátok és mutatók, hogy helyezzük csövek szuszpenziós tenyészetek vizsgált MMT - műanyag lemezek, a kutak, amelyek mutatók különböző szubsztrátok, amelyhez alkalmazzuk szuszpenziós tenyészet vizsgálatban. Az inkubálás után egy termosztát napi egy színváltozást jelző lemez (segítségével IRB) vagy a tartalmát a kutak (használatával MMT) ítélik meg a biokémiai tulajdonságai a tenyészet.

Pigment rezisztens genetikai tulajdonság mikroba és szín azonosítására használt kromogén baktériumok. A legtöbb patogén baktérium pigment nem jellemző. White. arany, citrom-sárga pigment formában staphylococcusok, sárga, krém - a Mycobacterium tuberculosis, rubinvörös - Serratia. kék-zöld - Pseudomonas aeruginosa.

Pigmentek általában védve a mikrobiális sejtek az ultraibolya sugárzásra.

Jellemzése bakteriális toxinok

Mérgező anyagok baktériumok által szintetizált a lipopoliszacharidok és fehérjék kémiai természetüktől (LPS). Először is, mint általában. által kiválasztott élő bakteriális sejt, és ezért nevezzük -ekzotoksiny. A második után kiadott sejthalál - endotoxin.

Endotoxinok - LPS. tartalmazott a sejtfal Gram-negatív baktériumok. A toxikus tulajdonságait endotoxin határozza meg a teljes LPS molekula. Az endotoxinok eltérően exotoxinokat jobban ellenáll a magasabb hőmérsékleten, kevésbé toxikus, nem specifikus. gyengén immunogén.

Endotoxinok különböző Gram-negatív baktériumok beadva a kísérleti állatoknak okoz ugyanilyen típusú reakció. Bevezetésével nagy dózisban a toxin állatokban megfigyelt gátlása fagocitózis és jelenségek kifejezett toxicitást (fáradtság, légszomj, hasmenés, csepp szívműködés, alacsony testhőmérséklet). Beadva kis adagban megfigyelhető az ellenkező hatást: stimulálása fagocitózis, toxémia kevésbé kifejezett, testhőmérséklet emelkedése.

Emberek átvételét nagy mennyiségű endotoxin a véráramban vezet mérgező szeptikus sokk. Ennek eredményeként, vérnyomáscsökkentő figyelhető eredményeként megnövekedett mennyiségű szerotonin és kininek bejövő a vérben és a keringési rendellenességek szervek és acidózis. Hatása endotoxinok a vérsejtek (granulociták, monociták), ami a láz, mert közülük endogén pirogének. Láztól egybeesik a korai leukopenia leukocytosist amely helyébe másodlagos.

Néhány baktérium képes egyszerre szintetizálni mind endotoxinokat, és fehérje-toxinokat, mint például a kolera, pestis, szalmonella, stb

Protein toxinok - exotoxinok - attól függően, hogy a kommunikáció a stroma a bakteriális sejtek vannak osztva szekretálódik, részlegesen szekretálódik és nesekretiruemye. Leírt több mint 80 különböző exotoxinokat. különböző molekulatömegű, kémiai szerkezet, „célsejtek” a mikroorganizmus és a biológiai aktivitás. Talán protein toxinok nem csak a sejtek pusztulását, szövetek és szervek, hanem részt vesz a metabolikus reakciók a baktériumok saját maguk, a termelők.

A hőmérsékletet tekintve különböztetik meg: a hő-labilis és hőstabil fehérje-toxinokat. Szóval például diftéria toxin elpusztult hőlabilis 60 ° C-on 1 órán át, és a tetanusz - 20 percig. - termostabil Clostridium botulinum toxinok, E. coli, Staphylococcus képesek elviselni rövid forralással.

Minden exotoxinokat van két összetevőből. A - ez egy receptor, és arra szolgál, hogy rögzítse a toxin molekulát a megfelelő „célsejt”, a második - a tényleges toxikus rész - behatol a sejtbe, blokkoló létfontosságú metabolikus reakciók.

A magas toxicitása a fehérje toxinok annak köszönhető, hogy a funkció a toxikus rész a szerkezet utánzó szerkezet a hormonok, enzimek és neurotranszmitterek mikroorganizmus. Ez teszi őket antimetabolitokra fent említett létfontosságú vegyületek, amelyek blokkolják a funkcionális aktivitása az utóbbi.

Specificitás határozza meg a mérgező hatása exotoxinok szelektív rögzítését, hogy a toxin a receptorok a „célsejtek” bizonyos szövetek (epiteliális, ideg, stb). Az emberi és állati szervezetben. Különbségek a hatásmechanizmusa ezen toxinok lehetővé tette, hogy osztályozza között négy csoport, amelyek mindegyike több alcsoportra (táblázat. 1).

Citotoxinok - blokk fehérjeszintézis a szubcelluláris szinten. Például, antielongatory (gistotoksin diftéria toxin Pseudomonas

coli és mások.). ártalmatlanná transzferáz II enzim felelős nyúlás (kapacitás) podipeptidnoy lánc a riboszómák.

Ez a csoport magában foglalja dermonekrotoksiny érintő hámsejtek és enterotoxinok érintő bélnyálkahártya sejtek.