Meghatározása enzimaktivitás - studopediya

Rate enzimatikus reakciót akkor ítéljük dörzsölés által vagy szubsztrát sebesség, vagy a termék képződésének mértékét. Egy egységnyi aktivitás bármilyen enzim (E) befogadó az az enzimmennyiség, amely katalizálja a konverzió optimális feltételek 1mkmolya szubsztrát 1 perc. Van egy másik specifikus aktivitással:

1 katalt - szám E, amely katalizálja a 1 mol szubsztrát 1 sec.

E 1 = 16,67 nkatal az enzim.

Ahhoz, hogy kifejezze a tevékenység az alkalmazott enzim és meghatározására specifikus molekuláris aktivitás. Fajlagos aktivitás - szám E fermenttivnoy tevékenység számít 1 mg fehérje. A magasabb stepenb enzim tisztítása, a nagyobb fajlagos aktivitást. A fordulatszám az enzim (a molekuláris aktivitása) - száma szubsztrát molekulák reagáltattuk egy molekula enzim 1 perc alatt. A fordulatok száma nagyon változó, például:

1) Karbongidraza (átvitelét katalizálja H2 CO3) végzi 36000000 fordulat / min

3) foszfoglükomutáz - 1240 fordulat / perc

A kvalitatív kimutatására és mennyiségi meghatározására aktivitásának komplex alkalmazott enzimek a következő módszerek:

OVER * H2 elnyeli a fényt. PVK a sugárzás látható az OVER * H2. Laktát 1 molekula 1 molekula képződik NAD * H2.

OVER * H2 fluoreszkál intenzíven. A fluoreszcencia intenzitása arányos a koncentrációval.

10. A lokalizációja az enzim a sejtekben, és a szerv-MARKORNYE enzimek.

Minden enzimek és folyamatok metabolieskie alosztályokba (külön és izolált). Egy normális sejtet, körülbelül 1000 enzimek. Rendezett enzim kölcsönhatás érjük el többszintű szabályozás és kompartmentalizáció. Ismerve a lokalizáció enzimek a sejtben, és meghatározzuk azok aktivitását a vérben, lehetőség van megítélni a mértékét szövetpusztulás.

Kernel: lokalizált RNS - polimeráz NAD - szintáz, enzimek részt vesz a DNS replikáció.

A mitokondriumok: enzimek szöveti légzést, oxidatív foszforiláció, a-enzimek a zsírsav-oxidáció, Krebs-ciklus, a karbamid szintézis.

Lizoszómák: hidrolitikus enzimek pH-optimuma a területen 5 (peptidek, észteráz).

A riboszómák: fehérjeszintézist enzimek.

EPS: lipid-szintézis enzimek, hidroxilezés enzimekkel méregtelenítés enzimek (metilén -

hangban, acetilezéssel) ragozás.

Membrán: Na -K -ATPáz, adenilil-cikláz, egy enzim szubsztrátum szállítási.

Citoplazma: glikolitikus enzimek, aktiválását aminosavak, zsírsavak szintézisét.

Multienzim rendszerek lokalizálódnak organellum szerkezetet úgy, hogy mindegyik enzim közvetlen közelében található a következő enzimet a reakció-szekvencia. Köszönhetően is kompartmentalizáció a sejt történhet egyidejűleg két inkompatibilis folyamat: oxidálási zsírsavak a mitokondriumok és a zsírsav-szintézist a citoplazmában).