Meghatározása hemoglobin-koncentráció

A legfontosabb meghatározására szolgáló módszerek a hemoglobin koncentrációja - kolorimetriás. Ezek széles körben használják a gyakorlatban, mert az egyszerűség és a hozzáférhetőség.

Hematit módszer (Sali módszer). Alapján az átalakítás a hemoglobin adva a vér sósavat hlorgemin (klorid hematit) barna színű, szín intenzitása arányos a hemoglobin-tartalom. A kapott hematit-klorid-oldattal hígítjuk, vízzel, hogy egy színt szabványos szerinti ismert hemoglobin-koncentráció.

Meghatározása végezzük egyszerűsített koloriméter - gemometre Sali. Ez a készülék tartalmaz egy műanyag három függőleges állvány csatlakozó. Az oldalsó rések 2 lezárt csöveket egy standard folyékony. A másodlagos csatlakozó gemometra ki felfelé nyitott fokozatos üvegcső azonos átmérőjű, mint a szín szabványoknak. A kalibrált csőbe van egy skála beosztással jelezve a hemoglobin mennyisége grammban 100 ml vér, azaz Gram Százalék (z%). Amikor gemometre különleges pipettával a víz és a keverőszár.

A kalibrált csőben öntjük hasadási jelölt szám „2 g%” (alsó kör jel) 0,1 g% sósavoldattal.

Ezután egyre vért a kapilláris pipettával egy jel „0,02 ml” szívó száj keresztül gumicső (ellenőrizze az oszlop a vér véget ért pontosan azon a szinten a címke nem szakadt és légbuborékok). Törölgette a külső a pipettahegy gyapjú, tűzi ki egy kémcsőbe 0,1 g% sósavoldattal és óvatosan fújt vér. Ismételt szívó és fúj fedőlap pipettával öblítőfolyadék. A csövet összerázzuk, és észrevette az idő, tedd egy állványt többször. A teljes konverzió a hemoglobin-klorid hematit igényel legalább 5 percig. 5 perc múlva gemometr emelte szemmagasságba, és összehasonlítjuk a színe a vizsgálati folyadék a színes szabványoknak. Általában (kivéve, ha rendkívül súlyos vérszegénység) ez sötétebb, mint a szabványos cső. A nem-osztályozott pipettával a vizsgálati oldatot csepegtetünk hozzá desztillált vizet, és keverjük egy üvegbottal, és összehasonlítják a szabványoknak. Amint a színe a vizsgált folyadék azonos lesz a szín szabványoknak, mondjuk mi osztás megegyezik a folyadék szintje (az alsó meniszkusz) in vitro.

Ipari termel gemometry tartalmazó Gram-százalékos skála.

Az ideális aránya figyelembe vér hemoglobin koncentrációját egyenlő 16,67% g, vagy 166,7 g / L.

Ha az összes szabályok gemometrom dolgozni egy és ugyanaz a beteg hemoglobin meghatározásához a vérben különböző részeinek eltérő belül elért eredmények ± 0,3 g% (3 g / l).

Tsianmetgemoglobinovy ​​módszer a legpontosabb, a legtöbb országban elfogadott, mint a standard.

Ez alapján az átalakítás a hemoglobin be cyanmethemoglobin adva vér reagens. Cyanmethemoglobin koncentrációt fotometriásan mértük. Mivel használata Drabkin reagens oldatot (NaHCO 3 - 1 g, KCN-ot - 0,05 g, K3 [Fe (CN) 6] - 0,2 g desztillált vizet, - legfeljebb 1 liter), vagy bármely más, hasonló hatásokat.

Hatása alatt a mirigyes sinerodistogo kálium-hemoglobin oxidálódik methemoglobin (Hb), amelyet azután segítségével a kálium cianin cyanmethemoglobin (hemoglobincyanide). A leggyakoribb a vér hígításban Drabkin-reagenst - 1. 250 (0,02 ml vér és reagens 5 ml). 20 perc múlva a teljes átalakuláshoz szükséges a hemoglobin hemoglobincyanide, ekstiktsiyu mérve hullámhosszon 540 nm-es és egy réteg vastagsága 1 cm vízzel szemben egy SF-4 vagy FEC-M és hasonlók photoelectrocolorimeter.

Jelenleg létrehozott erős tsianometgemoglobinovye szabványok ampullák, megfelelő pontosan meghatározott hemoglobin-koncentráció.

A kapott oldatokat vizsgáltuk photoelectrocolorimeter és felhívni a kalibrációs görbét az optikai sűrűség a készülék skálájáról (piros dob számok) az ordinátán, és a hemoglobin-koncentrációt gramm literenként az abszcisszán. hozzon létre egy munkalap alapuló kalibrációs görbe, jelezve, hogy milyen a hemoglobin koncentrációja ennek megfelelő jelzést FEC.

Ott koloriméterek, kifejezetten a hemoglobin - hemoglobinometers. Legtöbbjük használt tsianmetgemoglobinovy ​​módszer. Hemoglobin-mérőkészülékek függetlenül tud működni, vagy együtt részecske számláló. Tehát globinometer „Coulter” (Franciaország), amely használható önmagában, amely közvetlen bizonyítékot a hemoglobin gramm 100 ml. A műszer egy nagy pontossága és reprodukálhatósága g ± 0,1% (1 g / l).